如何进行T细胞分选?

一般用来做免疫细胞分选的方式有两种,正选负选(见图)。正选的优点是能准确的选到目标细胞,但目前市面上的正选产品多已磁珠与完整抗体连结为主,选难以将抗体由目标细胞上完全移除,也因此可能引发免疫反应而干扰了实验。另一常用的策略则是同使使用数个抗体来进行负选,与将不要的细胞与抗体连接后移除,缺点是可能有部分的非目标细胞没被清除,导致选后目标细胞的纯度不高,因此无法精准的进行后续实验。

Fab Streptamer®原理

Streptamer®系列产品结合了正选及负选的优点,以正选将细胞分离,再将试剂从细胞上移除,原理如下: Fab-Strep由特定抗体的Fab片段(非抗体!!)与亲合标签Strep-tag组合而成。利用Strep-tag与Strep-Tactin之间的链结,我们在Strep-Tactin上接了磁珠(左)或是萤光染料(右),如此一来,Fab片段与磁珠或染料就会形成复合体,上面的Fab可以辨识目标细胞,而磁珠或是萤光染料就可以搭配强力磁座做磁性分选,或是用来做FACS分析。

又因Strep-tag与Strep-Tactin之间的连结较Biotin与Strep-Tactin之间的连结弱,加入Biotin之后,Fab Strep就会从Strep-Tactin脱离,而Fab Strep若单一存在也相当的不稳定,不会留在细胞上,因此选完之后可以将试剂完全去除,最后获得功能完整、没有标记的目标T细胞,请见流程图解:

Fab Streptamer®全产品

 

针对不同的T细胞,我们发展出不同的Fab Streptamers,您可以根据实验需求做选择。详见以下表格:

 Cell of interest

 Fab Streptamer® Isolation kit 

 Cat. No.

 T cells

 CD3+

 6-8000-201

 Helper T cells

 CD4+

 6-8000-206

 Cytotoxic T cells

 CD8+

 6-8000-203

 Naive T cells

 CD45RA+

 6-8000-208

 CD62L+

 6-8000-204

 CD4+CD45RA+

 6-8000-221

 CD8+CD62L+CD45RA+

 6-8000-219

 Memory T cells

 CD45RO+

 6-8000-209

 CD3+CD45RO+

 6-8000-217

 CD3+CD62L+CD45RA-

 6-8000-216

 CD3+CD62L+CD45RO+

 6-8000-212

 Memory CD4+ T cells

 CD4+CD62L+CD45RA-

 6-8000-215

 CD4+CD62L+CD45RO+

 6-8000-211

 Memory CD8+ T cells

 CD8+CD62L+CD45RA-

 6-8000-213

 CD8+CD62L+CD45RO+

 6-8000-210

 Regulatory T cells

 CD25+

 6-8000-207

 CD4+CD25+

 6-8000-205

 CD4+CD25+CD45RA+

 6-8000-214

 

 相关产品 

 产品名 

 Cat. No.

 強力磁極

 StrepMan Magnet for 15ml and 50ml tubes

 6-5650-065

 萤光染料

 Strep-Tactin® PE for Fab Streptamers 

 6-5001-010

 Strep-Tactin® APC for Fab Streptamers 

 6-5011-010

 

*仅适用于基础研究,不得用于治疗!

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